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細(xì)胞培養(yǎng)
緩沖液
A1049201ACK 裂解緩沖液
產(chǎn)品分類(lèi)
品牌:Thermofisher Scientific/賽默飛世爾
產(chǎn)品名稱(chēng):ACK 裂解緩沖液
型號(hào):A1049201
?成分?:氯化銨(NH?Cl)、碳酸氫鉀(KHCO?)、乙二胺四乙酸二鈉(Na?EDTA)12。
?原理?:銨根離子(NH??)無(wú)法通過(guò)紅細(xì)胞膜,而其他離子可自由通過(guò),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)滲透壓升高,水分內(nèi)流使紅細(xì)胞膨脹破裂,同時(shí)保留有核細(xì)胞(如淋巴細(xì)胞)的完整性12。
?適用樣本?:人、大小鼠等哺乳動(dòng)物新鮮血液或組織樣品12。
?不適用樣本?:鳥(niǎo)類(lèi)或禽類(lèi)等有核紅細(xì)胞12。
?保存溫度?:4℃避光保存,有效期通常為12個(gè)月25。
?運(yùn)輸條件?:常溫配送,避免反復(fù)凍融15。
?樣本處理?:全血離心棄上清,獲得細(xì)胞沉淀23。
?裂解反應(yīng)?:按1:3至1:10比例加入ACK裂解液(如1mL細(xì)胞沉淀加3-10mL裂解液),輕柔混勻后室溫孵育1-5分鐘23。
?離心洗滌?:400-500g離心5分鐘,棄紅色上清,重復(fù)洗滌1-2次以去除殘留裂解液23。
?后續(xù)應(yīng)用?:沉淀細(xì)胞可用于流式分析、原代培養(yǎng)或核酸/蛋白提取25。
?無(wú)菌操作?:裂解液為無(wú)菌試劑,需在超凈臺(tái)內(nèi)操作以避免污染12。
?比例調(diào)整?:白血病等特殊病例需增加裂解液比例(如1:4)12。
?安全防護(hù)?:操作時(shí)需穿戴實(shí)驗(yàn)服和手套15。
?殘留紅細(xì)胞?:微量殘留不影響多數(shù)檢測(cè),可忽略或重復(fù)裂解12。
?細(xì)胞分離?:淋巴細(xì)胞純化、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)56。
?分子實(shí)驗(yàn)?:核酸提取(無(wú)需DEPC處理)、蛋白分析26。
?流式分析?:去除紅細(xì)胞干擾,提高檢測(cè)準(zhǔn)確性12。
?優(yōu)勢(shì)?:特異性裂解紅細(xì)胞,對(duì)淋巴細(xì)胞損傷小18。
?局限性?:僅適用于無(wú)核紅細(xì)胞,不適用于核膜完整的細(xì)胞
品牌:Thermofisher Scientific/賽默飛世爾
產(chǎn)品名稱(chēng):ACK 裂解緩沖液
型號(hào):A1049201
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